醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮為合成的孕激素類(lèi)藥物，有明顯的孕激素和抗雄激素作用，可抑制排卵。孕激素對(duì)垂體促性腺激素的釋放有一定的抑制作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明有死胎率增加和致畸作用，副作用有：（１）惡心、頭暈、倦怠；（２）突破性出血；（３）孕期服用，會(huì)增加女性后代的男性化作用。孕激素類(lèi)藥物能增強(qiáng)體內(nèi)物質(zhì)沉積和改善生產(chǎn)性能，可以很快產(chǎn)生顯著和直接的經(jīng)濟(jì)效益，因此，對(duì)生產(chǎn)者有很大的吸引力。畜牧業(yè)中使用孕激素類(lèi)藥物（非治療用途）已有很長(zhǎng)的歷史，但人類(lèi)長(zhǎng)期食用含有激素的肉制食品，即使含量甚微，亦會(huì)明顯影響機(jī)體的激素平衡，而且有致癌危險(xiǎn)，對(duì)幼兒造成發(fā)育異常等危害。因此，開(kāi)發(fā)一種能檢測(cè)孕酮?dú)埩袅康姆椒ㄊ鞘直匾摹１疚牟捎靡合嗌V法對(duì)牛和豬脂肪樣品中的孕酮進(jìn)行檢測(cè).

1　試劑與儀器

1．1　試劑　醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標(biāo)準(zhǔn)品，乙腈，甲醇，乙酸乙酯，其他試劑為分析純。水由凈化系統(tǒng)制得。

　　（１）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：１０００μｇ／ｍｌ，分別準(zhǔn)確稱(chēng)取0.05ｇ 醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標(biāo)準(zhǔn)品于５０ｍｌ容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用一年。

　　（２）混合中間溶液Ｉ：１００μｇ／ｍｌ，分別吸取10.0ｍｌ 醋酸美侖孕酮、醋酸氯地孕酮和醋酸甲地孕酮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于１００ｍｌ 容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用一年。

　　（３）混合中間溶液ＩＩ：１．０μｇ／ｍｌ，取１．００ｍｌ 混合中間溶液Ｉ于１００ｍｌ 容量瓶中，用甲醇定容。于４℃保存，可使用半年。

（４）混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別吸取１０、２０、４０、８０、１００μｌ 混合中間溶液ＩＩ 添加到９８０、９７０、９５０、９１０、８９０μｌ 的乙腈－水（６５：３５）中，再加入１０μｌ ０．２％鹽酸溶液，混勻，得到濃度為０．０１０μｇ／ｍｌ、０．０２０μｇ／ｍｌ、０．０４０μｇ／ｍｌ、０．０８０μｇ／ｍｌ 和０．１０μｇ／ｍｌ 混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，供液相色譜測(cè)定，當(dāng)日使用。

1．2　儀器　LC7000 液相色譜系統(tǒng)，LC7011泵體，LC7020 紫外－可見(jiàn)檢測(cè)器，Hanon-Clarity色譜軟件。氮吹儀；海能全自動(dòng)固相萃取裝置；低溫離心機(jī)；渦旋混勻器；ＣＮ 固相萃取柱。