凱氏定氮法是由丹麥化學(xué)家凱道爾于1833年建立的，現(xiàn)已發(fā)展為微量、常量、平微量凱氏定氮法以及自動定氮儀法等，是分析有機化合物含氮量的常用方法。凱氏定氮法的理論基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)中的含氮量通常占其總質(zhì)量的16%左右，因此，通過測定物質(zhì)中的含氮量便可估算出物質(zhì)中的總蛋白質(zhì)含量。

　　凱式定氮儀是根據(jù)蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理，通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質(zhì)含量的儀器。因其蛋白質(zhì)含量測量計算的方法叫做凱氏定氮法，故被稱為凱氏定氮儀。

　　下面小編作為凱式定氮儀廠家要為大家介紹的就是凱式定氮儀的操作方法：

　　一、消化

　　根據(jù)樣品量的多少選擇適宜的凱氏燒瓶4個，其中2個為對照。向燒瓶內(nèi)加入準確稱量的樣品，注意要把樣品加至燒瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶頸上。另外2個作空白對照，好對樣品進行校正。

　　在每個燒瓶中加入約300毫克硫酸鉀-硫酸銅混合物，再用量筒加入3毫升濃硫酸。將上述4個凱氏燒瓶放在通風(fēng)良好處加熱消化。先用小火加熱至沸騰。此時會產(chǎn)生大量泡沫，應(yīng)特別注意不能讓黑色物質(zhì)上升到燒瓶頸部，否則將嚴重影響分析結(jié)果。當(dāng)混合物停止冒泡，蒸汽與二氧化硫也均勻地放出時，將火焰調(diào)節(jié)到保持瓶內(nèi)液體微微沸騰。

　　在消化過程中要時常轉(zhuǎn)動燒瓶，使全部樣品都浸在消化液中。當(dāng)消化液呈清澈淡藍色時即告消化結(jié)束。若樣品中含賴氨酸或組氨酸較多時，消化時間需要延長1-2倍。因為這兩種氨基酸中的氮在短時間內(nèi)不易消化*。

　　二、蒸餾

　　洗滌蒸餾儀：用硼酸指示劑測是否清洗干凈。干凈標準：指示劑不變色。

　　樣品和空白的蒸餾：取2毫升稀釋消化液至加樣口加入反應(yīng)室，關(guān)閉加樣口，另取1個裝硼酸指示劑的三角瓶接于冷凝管下端。取30%*溶液約10毫升，從加樣口緩慢加入，當(dāng)未加完時關(guān)閉，并加入約3毫升蒸餾水，再繼續(xù)緩慢加入一半后關(guān)閉，讓剩下的水作液封。將加熱器重新放在蒸汽發(fā)生器下加熱，待三角瓶中液體由紫紅變成鮮綠色起開始計時，蒸餾5分鐘，然后移動三角瓶使液面離開冷凝管口約1厘米，并用少量蒸餾水洗滌冷凝管口外周，繼續(xù)蒸餾1分鐘。空白同樣。

　　清洗儀器，同上，不*指示劑。

　　三、滴定

　　用0.0100mol/L標準鹽酸滴定三角瓶中收集的氨，直至硼酸指示劑由綠變紫紅。